PCR檢測(cè)試劑盒有效期一般為1年，這是指在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。天津

產(chǎn)品名稱(chēng)：沃爾巴克氏菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

英文名稱(chēng)：Wolbachia spp.

產(chǎn)品貨號(hào)：LZ-P4203

分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

【結(jié)果分析條件設(shè)定】

沃爾巴克氏菌通用u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號(hào)比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號(hào)無(wú)較大波動(dòng)），起始點(diǎn)（Start）應(yīng)避開(kāi)熒光采集起始階段的信號(hào)波動(dòng)，終止點(diǎn)（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點(diǎn)。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.  陰性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性，無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct；

2.   陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小于等于35；

3.   以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

【結(jié)果判斷】

1.陽(yáng)性：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性；

3.   陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

　　?、僖锱c模板DNA特異正確的結(jié)合；

　　　②堿基配對(duì)原則；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

　　　④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2)沃爾巴克氏菌通用試劑靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 熒光定量PCR試劑盒對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR檢測(cè)步驟:

1樣品處理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取樣品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無(wú)菌容器中均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培養(yǎng)18-24h。

注：也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷卻至室溫，吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出SA預(yù)混液，充分融化，短暫離心，然后將陰性對(duì)照、樣品的DNA提取液、陽(yáng)性對(duì)照各取5μL分別加入PCR管中，蓋好管蓋，短暫離心，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4、PCR擴(kuò)增

PCR管置于PCR儀上，推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下：反應(yīng)體系為25μL，在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)，檢測(cè)通道選擇FAM。

公司正在出售的產(chǎn)品：

純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒

植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法

冰凍切片組織PAR-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

GSK-3ALPHA蛋白共沉淀分析試劑盒

C. krusei RFLP基因分析試劑盒

血液甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSH ST）總活酶動(dòng)力性比色法定量檢測(cè)試劑盒

體液誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞一氧化氮合成酶（iNOS /NOS2/mNOS）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

組織基質(zhì)金屬（MMP-1）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞絡(luò)酸酶（TP）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞膠原蛋白（collagen）比色法定量檢測(cè)試劑盒

酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基

糖果D-葡萄糖激酶法定量檢測(cè)試劑盒

氧化蛋白質(zhì)水解酶

星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框96抗體

Cullin3抗體

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體

CD44V10抗體

染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1抗體

口蹄疫病毒A型抗體

多肽N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移酶11抗體

GATA結(jié)合蛋白4抗體

沃爾巴克氏菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒組蛋白H3抗體

• 

  小鼠子宮平滑肌細(xì)胞

  3191元

  產(chǎn)品名：小鼠子宮平滑肌規(guī)格,小鼠子宮平滑肌型號(hào),小鼠子宮平滑肌價(jià)格,小鼠子宮平滑肌品牌

• 

  小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

  3191元

  產(chǎn)品名：小鼠主動(dòng)脈平滑肌規(guī)格,小鼠主動(dòng)脈平滑肌型號(hào),小鼠主動(dòng)脈平滑肌價(jià)格,小鼠主動(dòng)脈平滑肌品牌

• 

  小鼠支氣管上皮細(xì)胞

  3856元

  產(chǎn)品名：小鼠支氣管上皮規(guī)格,小鼠支氣管上皮型號(hào),小鼠支氣管上皮價(jià)格,小鼠支氣管上皮品牌

• 

  小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

  3634元

  產(chǎn)品名：小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮規(guī)格,小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮型號(hào),小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮價(jià)格,小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮品牌

• 

  小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

  3856元

  產(chǎn)品名：小鼠胰腺導(dǎo)管上皮規(guī)格,小鼠胰腺導(dǎo)管上皮型號(hào),小鼠胰腺導(dǎo)管上皮價(jià)格,小鼠胰腺導(dǎo)管上皮品牌

• 

  小鼠牙周膜成纖維細(xì)胞

  3413元

  產(chǎn)品名：小鼠牙周膜成纖維規(guī)格,小鼠牙周膜成纖維型號(hào),小鼠牙周膜成纖維價(jià)格,小鼠牙周膜成纖維品牌

• 

  小鼠牙齦成纖維細(xì)胞

  3302元

  產(chǎn)品名：小鼠牙齦成纖維規(guī)格,小鼠牙齦成纖維型號(hào),小鼠牙齦成纖維品牌,小鼠牙齦成纖維價(jià)格

• 

  小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

  4078元

  產(chǎn)品名：小鼠小腸隱窩上皮規(guī)格,小鼠小腸隱窩上皮型號(hào),小鼠小腸隱窩上皮價(jià)格,小鼠小腸隱窩上皮品牌