綿羊α半乳糖基抗原(Gal)ELISA試劑盒

HBsAg試劑特點（檢測：臨床夾心法）：包被為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位，可測得HBsAg變異樣品，檢測的特（99.98%）檢測的靈敏度，應(yīng)用Parl Ehrich 學說（PEI）HBsAg品，對ad品的靈敏度為0.05ng/ml對ay品靈敏度為0.025ng/ml

 產(chǎn)品特點

 

一、、靈敏、特異的；

二、的重復(fù)性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底度高的固相載體；

四、適用、、組織勻漿液、細胞上清液、等等多種標本類型；

五、節(jié)省實驗經(jīng)費。

 

制備：

包括以下步驟：

(1)抗原表位的計算機篩選；

(2)抗原的制備；

(3)的采集；

(4)間接ELISA的建立；

(5)間接ELISA的性和特驗證；

(6)試劑盒的性驗證；

(7)對屠宰場進行臨床檢測。該簡單、快速、靈敏度高、特強、性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預(yù)防、控制流行和由豬向人傳播。

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性，酶標記的抗原或既保留其學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的或抗原）與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與中的其他分開。再加入酶標記的抗原或，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果，使測定達到很高的度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定。

ELISA檢劑盒應(yīng)用定性夾心檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM，這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

ELISA實驗通用規(guī)則

1、要移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。有人員進行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的后，要更換槍頭。即使是吸取品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更。

4、實驗時，要使底物避光保存。

5、用槍吸取時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

6、吸取時，要用量程和需要量接近的槍去吸，誤差。

7、將加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)，可使槍頭上的液滴和孔壁，液滴會自然流下去。

8、全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻。也可以用酶標儀的晃動功能。

9、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。

10、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加。沒有洗板機時，倒去后，要將酶標板在報紙或毛紙上拍干。

11、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

12、底物是光的，要在臨用前現(xiàn)配。

13、檢測前，要打開酶標儀，使之10分鐘以上。

14、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免。

15、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。

16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

17、應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能數(shù)據(jù)的準確性。

18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它進行確證。

 

 

 臨床測定技術(shù)的發(fā)展主要在于學的發(fā)展，而學的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進步更新和型標記物的應(yīng)用。分子生物學正在并終肯定會讓對整個生命科學有一個而的認識，其對測定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的，對以些難以檢測的生物活性的測定，并且大大了檢測的靈敏度和特。